安捷倫色譜柱的使用需謹(jǐn)慎,以免造成不必要的損失
瀏覽次數(shù):1966發(fā)布日期:2019-08-27
安捷倫色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。安捷倫色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。
安捷倫色譜柱的使用包括安裝、流動相、樣品制備以及保存,稍有不慎,會對整個試驗(yàn)造成很大的影響。
1、首先應(yīng)確認(rèn)柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線,同時控制進(jìn)樣器、安捷倫色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝安捷倫色譜柱之前,確認(rèn)流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護(hù)柱。
2、為了使安捷倫色譜柱與儀器系統(tǒng)達(dá)佳的連接效果,應(yīng)盡量使用與安捷倫色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的安捷倫色譜柱,建議在連接新安捷倫色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況,避免造成安捷倫色譜柱的損壞或因安捷倫色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手?jǐn)Q緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過100℃。
安捷倫色譜柱流動相
1、在進(jìn)行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動相使安捷倫色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應(yīng)當(dāng)天配制以保持新鮮避免細(xì)菌產(chǎn)生。
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和安捷倫色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18安捷倫色譜柱,以免柱性能損壞(添加5%的有機(jī)溶劑沖洗安捷倫色譜柱,同時可以達(dá)到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使安捷倫色譜柱更容易平衡)。
3、流動相需脫氣后使用,可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與安捷倫色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別,應(yīng)該使用過度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對安捷倫色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相安捷倫色譜柱比反相安捷倫色譜柱需要更長的平衡時間。
安捷倫色譜柱樣品制備
1、樣品應(yīng)當(dāng)盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中。除特殊指明外,如使用強(qiáng)溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低。
2、樣品溶液在進(jìn)樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾。頻繁改變流動相組成,會加速降低柱效。
3、安捷倫色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力。為獲得佳分離效果,使用時請不要超過200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會造成硅膠填料的破壞,減少安捷倫色譜柱的使用壽命。除特殊要求外高操作溫度不要超過60℃。
安捷倫色譜柱保存操作
1、如果流動相含有酸或無機(jī)鹽,應(yīng)當(dāng)先用去離子水(20倍柱體積)沖洗干凈。然后用用100%乙腈或甲醇保存安捷倫色譜柱。后用柱子的接頭密封,并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放。
2、應(yīng)避免安捷倫色譜柱受到直接的機(jī)械沖擊或摔落,避免造成安捷倫色譜柱性能的降低。